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產(chǎn)品展示
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天青A-伊紅染色液
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產(chǎn)品報價:
產(chǎn)品特點:
天青A-伊紅染色液公司正在出售的產(chǎn)品:100g 吸附樹脂 XAD7 Amberlite XAD7 常溫保存Cary-Blair氏運送培養(yǎng)基管 Cary-Blair Transport Medium 20支/包5mL 肝素瓊脂糖 Heparin Agarose 4℃保存2 ug pTaq pTaq 低溫運輸,-20℃保存100g RNTris Base (三羥甲基氨基甲烷) 常溫
  天青A-伊紅染色液的詳細(xì)資料:

培養(yǎng)操作步驟

1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。 

產(chǎn)品參數(shù):

中文名稱

英文名稱

產(chǎn)品規(guī)格

產(chǎn)品貨號

天青A-伊紅染色液


2×50ml

BJ-01X6970

商品詳細(xì)介紹:

用途:

漿細(xì)胞核深藍(lán)色,胞質(zhì)灰藍(lán)色。

儲存條件:室溫,避光,6個月

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

2.png 

實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機(jī)率;

5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點:

1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。

5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實驗。

Foot-and-Mouth Disease Virus(FMDV)口蹄疫病毒A亞型RT-LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周P53(wt-p53)  瘤抑制基因抗體(野生型P53) 規(guī)格: 0.1ml

Haemophilus paragallinarum副雞嗜血桿探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周GAD65  谷脫羧-65抗體(C端) 規(guī)格: 0.1ml

Radix aconiti lateralis preparata附子染料法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周CD133  造干細(xì)胞抗原CD133抗體 0.1ml

Adenovirus(AV)腺病毒A型LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周RBM26  RNA結(jié)合蛋白26抗體 規(guī)格: 0.2ml

Human Herpesvirus-6B(HHV-6B)人皰疹病毒6B型探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周Phospho-Syk (Tyr323)  磷酸化非受體型酪蛋白激抗體 規(guī)格: 0.1ml

Fructus quisqualis使君子探針法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周CD33/Siglec-3  CD33抗體 規(guī)格: 0.1ml

Cowdria ruminantium反芻獸考德里氏體LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周Rabbit Anti-chicken IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗雞IgG 規(guī)格: 0.1ml

Enterovirus(EV)腸道病毒通用探針法熒光定量RT-PCR試劑盒,停 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周AVPR2  加壓素受體2抗體 規(guī)格: 0.1ml

Phomopsis longicolla 大豆擬莖點種腐病染料法熒光定量PCR試劑盒 定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周phospho-Bcl-xL/BCL2L1(Thr115)  磷酸化Bcl-xL蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

核桃源性成分PCR檢測試劑盒 種源性檢測/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周Mouse Anti-Guinea pig IgG/Cy5.5  Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml

天青A-伊紅染色液人抗鏈激(SK)抗體免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

牛津瓊脂(OXA)基礎(chǔ) 英文名稱:Oxford Agar Base 產(chǎn)品規(guī)格:250g

人副腫瘤性天皰瘡(PNP)抗體免疫試劑盒*直銷

BSSA瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱:BSSA agar medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g

α平滑肌肌動蛋白(α-SMA)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

(SS)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

犬內(nèi)皮生長因子受體(EGFR)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

小鼠糖皮質(zhì)激素受體α(GR-α)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

α干擾素(IFN-α)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

小鼠催乳素抑制激素(PIH)免疫試劑盒*直銷

大鼠抑胃肽(GIP)免疫試劑盒*直銷

 


產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 天青A-伊紅 染色液
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