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商品詳細介紹：

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

培養(yǎng)操作步驟 ：

1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。 

實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；

2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；

4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；

5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉移至離心管內。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。

5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養(yǎng)。

6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。

Arcanobacterium equi馬隱秘桿LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周NK-2R  神經激肽A受體/K物質受體抗體 規(guī)格: 0.1ml

Mycobacterium tuberculosis(MTB)結核分枝桿探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周F-Actin  纖維狀肌動蛋白抗體 0.1ml

Anguina agrostis剪股穎粒線蟲PCR試劑盒 植物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周4EBP2  eIF4E結合蛋白2抗體 0.1mlDog IgM/PE  PE標記的兔抗犬IgM抗體 規(guī)格: 0.1ml

Babesia gibsoni吉氏巴貝斯蟲染料法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用） 50次 低溫 負20度 一年 2-3周NFX1  核轉錄因子X盒結合蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2mlPGGT1A/FNTA  蛋白香葉烯基轉移1α抗體 規(guī)格: 0.2ml

Influenza Virus A甲型流感（）病毒H7N9亞型 RT-LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Phospho-MKK4(Ser80)  磷酸化絲裂原活化蛋白激激4抗體 規(guī)格: 0.1mlMTFR1  線粒體裂變調節(jié)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml

Simian T Lymphotropic Virus type 1(STL V-1) 猴T淋巴  趨向性病毒1型染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用） 50次 低溫 負20度 一年 2-3周phospho-IGF1R(Tyr1165+Tyr1166)  磷酸化胰島素樣生因子1受體抗體 規(guī)格: 0.1mlARMCX1  ARM重復X連鎖蛋白ARMCX1抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rhizoma chuanxiong川芎染料法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周EphB1+EphB2+EphB3+EphB4  酪蛋白激受體B1+B2+B3+B4抗體 規(guī)格: 0.2mlRIPK3  受體結合絲蘇激3抗體 規(guī)格: 0.1ml

Bacillus spp.芽孢桿通用LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周phospho-c-Raf(Ser338/Tyr340)  磷酸化原基因c-Raf抗體 規(guī)格: 0.1mlMASP  甘露聚糖結合凝集素絲肽1抗體 規(guī)格: 0.2ml

Bluetongue Virus(BTV)藍舌病病毒8型探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周DPP9/DPRP2  二肽基肽9抗體 規(guī)格: 0.2mlRabbit Anti-mouse IgM/HRP  辣根過氧化物標記的兔抗小鼠IgM 規(guī)格: 0.1ml

Radix angelicae pubescentis獨活染料法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周PTPH1/PTPN3  蛋白酪磷酸H1抗體 規(guī)格: 0.2mlUCP-1  線粒體脫偶連蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml

DNA拓撲異構酶I抑制劑(Campathecin)磷鉬酸水溶液(1%)

醛品紅染色液

鞣酸/單寧酸水溶液(5%)

福爾馬林-EDTA脫鈣液

Plank-Rychlo脫鈣液

Perenyi's脫鈣液

Von Ebener's液

甲酸脫鈣液

AFIP甲酸-檸檬酸液

檸檬酸鹽脫鈣液

JYBL-Ⅰ脫鈣液