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產(chǎn)品展示
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酸性α-乙酸萘酚酯酶染色液(ANAE法)
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產(chǎn)品型號(hào):
產(chǎn)品報(bào)價(jià):
產(chǎn)品特點(diǎn):
酸性α-乙酸萘酚酯酶染色液(ANAE法)公司正在出售的產(chǎn)品:50次 柱式植物RNAout Column Plant RNAOUT 4℃保存2 ug pCEP4-CAT pCEP4-CAT 低溫運(yùn)輸,-20℃保存酪蛋白葡萄糖瓊脂 Sabouraud Dextrose Agar 250g1g 對(duì)苯 -β-D- 吡喃半乳糖苷 p-Nitrophenyl-β-D-Galacto-Pyranoside(PN
  酸性α-乙酸萘酚酯酶染色液(ANAE法)的詳細(xì)資料:

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1) 準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗,1%。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

二. 細(xì)胞處理:

1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

中文名稱:酸性α-乙酸萘酚酯酶染色液(ANAE法)

英文名稱:

產(chǎn)品規(guī)格:3×10ml|3×20ml

產(chǎn)品貨號(hào):BJ-01X6815

用途:

又稱非特異性酯酶染色液,可用于血液、骨髓或細(xì)胞涂片、冰凍切片的非特異性酯酶染色,亦可作抑制試驗(yàn)

注意事項(xiàng):

其原理是酸性條件下細(xì)胞中的酸性酯酶將α-乙酸萘酚水解產(chǎn)生α-萘酚,α-萘酚再與六偶氮副品紅偶聯(lián),生成不溶性紅色沉淀,定位于細(xì)胞質(zhì)。

儲(chǔ)存條件:4℃,避光,6個(gè)月


QQ截圖20220509112004.png

細(xì)胞培養(yǎng)方法:

1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

Actinomyces naeslundii內(nèi)氏放線LAMP試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周C12ORF54  12號(hào)染色體開放閱讀框54抗體 規(guī)格: 0.2ml

Turnip Yellow Mosaic Virus(TYMV)大頭菜黃花葉病毒RT-PCR試劑盒 植物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周ZNF217  鋅指脂蛋白217抗體 規(guī)格: 0.2ml

Matrii sulfas exsiccatus玄明粉PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周phospho-PIK3C3(Ser282)  磷酸化磷脂酰肌醇激3催化亞單位3抗體 規(guī)格: 0.1ml

Schistosoma spp.血吸蟲通用熒光及可視化LAMP試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周phospho-ITGB3(Tyr785)  磷酸化整合素β3抗體 規(guī)格: 0.1ml

Plasmodium ovale卵形瘧原蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周CANX/Calnexin  鈣連蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

Semen sesami nigrum黑芝麻探針法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周Rabbit Anti-dog IgG/Gold  膠體金標(biāo)記的兔抗狗IgG 規(guī)格: 0.5ml

Candida spp.念珠通用LAMP試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周BIRC5/Survivin variant  細(xì)胞凋亡抑制因子5抗體 規(guī)格: 0.2ml

Getah virus(GETV)蓋塔病毒探針法熒光定量RT-PCR探針法熒光定量PCR試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周C5orf35  5號(hào)染色體開放閱讀框35抗體 規(guī)格: 0.2ml

Radix linderaeLAMP鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周CCDC117  卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白117抗體 規(guī)格: 0.2ml

Enteric Cytopathic Human Orphan Virus(ECHO)腸道致  病變?nèi)斯聝翰《綬T-LAMP試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周Goat Anti-rat IgG/RBITC  羅丹明標(biāo)記的羊抗大鼠IgG 規(guī)格: 0.3ml

酸性α-乙酸萘酚酯酶染色液(ANAE法)大鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

兔子核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

大鼠抗鏈球菌溶血素O抗體(IgG)免疫試劑盒*直銷

人游離睪酮(F-TESTO)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

大鼠Toll樣受體4(TLR4)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

人酸性富亮核磷蛋白32家族成員E(ANP32E)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

RV肉湯 英文名稱:RV Broth 產(chǎn)品規(guī)格:10ml*20支/包

人類風(fēng)濕因子(RF)抗體(IgG)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

酵母浸出物葡萄糖土瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱:Yeast Extract Glucose Oxytetracycline Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g

人黃氧化(XOD)免疫試劑盒*直銷

尿素卵黃雙糖培養(yǎng)基 英文名稱:Urea- Egg Yolk double sugar Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 酸性α-乙酸萘酚酯 ANAE法
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