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酸性磷酸酶測(cè)試盒100管/48樣
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產(chǎn)品型號(hào):
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產(chǎn)品特點(diǎn):
酸性磷酸酶測(cè)試盒100管/48樣公司正在出售的產(chǎn)品:0.156-10 ng/mL 人Metaxin蛋白1(Metaxin-1)ELISA試劑盒 0.625-40 ng/mL 人窖蛋白(Cav-1)ELISA試劑盒 31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Coactosin-like protein 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human
  酸性磷酸酶測(cè)試盒100管/48樣的詳細(xì)資料:

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱:酸性磷酸酶測(cè)試盒100管/48樣

檢測(cè)方法:微量法

產(chǎn)品分類:酯酶系列

產(chǎn)品規(guī)格: 100管/48樣

檢測(cè)方法:微量法

產(chǎn)品貨號(hào):BJ-01S9731

商品介紹:

測(cè)定意義:

ACP在酸性條件下催化磷酸單酯水解稱無(wú)機(jī)磷酸,常見(jiàn)于巨噬細(xì)胞的溶酶體內(nèi)。ACP常用于前列腺癌的輔助診斷。

測(cè)定原理:

在酸性環(huán)境中,ACP催化磷酸苯二鈉水解生成,與4-氨基安替和鐵反應(yīng)生成紅色亞醌衍生物,在510nm有特征光吸收;通過(guò)測(cè)定510nm吸光度增加速率,來(lái)計(jì)算ACP活性。

自備儀器和用品:

紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器和蒸餾水。

圖片1.png 

所需的儀器和用品:

可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:

建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)

樣本和試劑浪費(fèi)!

1、樣本制備

組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行

勻漿(或使用各類常見(jiàn)勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進(jìn)行提取

 

細(xì)菌/細(xì)胞樣本:

先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。

【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10

4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。
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注意事項(xiàng):

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。

2、對(duì)照管只需要做一管。

3、若對(duì)照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?

對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過(guò)低可能是(1)試劑二或試劑四沒(méi)有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒(méi)有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間30min可以延長(zhǎng)到40min)。對(duì)照管吸光值過(guò)高可能是試劑二未按操作說(shuō)明書(shū)稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測(cè),通??梢允箿y(cè)定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

 


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