免疫組化實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生組織切片非特異性染色分析：

1、抗體孵育時間過長、抗體濃度高易增加背景著色。這可通過縮短一抗/二抗孵育時間、稀釋抗體來控制。這是最重要的一條； 

2、一抗用多克隆抗體易出現(xiàn)非特異性著色，建議試用單克隆抗體看看； 

3、內(nèi)源性過氧化物酶和生物su在肝臟、腎臟等組織含量很高（含血細(xì)胞多的組織），需要通過延長滅活時間和增加滅活劑濃度來降低背景染色； 

4、非特異性組分與抗體結(jié)合，這需要通過延長二抗來源的動物免疫血清封閉時間和適當(dāng)增加濃度來加強(qiáng)封閉效果； 

5、DAB孵育時間過長或濃度過高； 

6、PBS沖洗不充分，殘留抗體結(jié)果增強(qiáng)著色，在一抗、二抗或SP孵育之后的浸洗尤為重要； 

7、標(biāo)本染色過程中經(jīng)常出現(xiàn)干片，這容易增強(qiáng)非特異性著色。