抗原是指能夠刺激機體產(chǎn)生（特異性）免疫應(yīng)答，并能與免疫應(yīng)答產(chǎn)物抗體和致敏淋巴細胞在體內(nèi)外結(jié)合，發(fā)生免疫效應(yīng)（特異性反應(yīng)）的物質(zhì)。介紹檢測抗原的三種方法：
1、雙抗體夾心法：
屬于非競爭結(jié)合，檢測抗原常用的方法，檢測含有至少兩個抗原決定簇的多價抗原。原理是先將特異性抗體與固相載體連接；加入待測標本，形成固相抗原抗體復合物；再加入酶標抗體形成雙抗體夾心，洗滌；加底物顯色，根據(jù)顏色反應(yīng)的程度進行該抗原的定性或定量檢測。
如血清標本中有類風濕因子（RF） 存在，則可出現(xiàn)假陽性反應(yīng)，因為RF是一種抗變性IgG的自身抗體，它能與多種動物的變性IgG的Fc部分結(jié)合，因此RF就可作為固相抗體和酶標抗體之間的橋接抗原。
雙抗體夾心法只適用于二價或以上的較大分子抗原的測定，不能用于小分子半抗原的檢測。

2、雙位點一步法：
針對抗原分子上兩個不同且空間距離較遠的決定簇，包被使用一種單抗，酶標記使用另一種單抗。測定時將待測抗原和酶標抗體同時加入，溫育、洗滌，加入底物顯色。若待測抗原濃度過高時，過量的抗原可分別同固相抗體和酶標抗體結(jié)合而抑制夾心復合物的形成，出現(xiàn)鉤狀效應(yīng) ，顯色降低，甚至假陰性。必要時可將標本經(jīng)過適當稀釋后重復測定。

3、競爭法：
用于測定小分子抗原，如藥物、激素 等。原理為先用抗小分子的特異性抗體包被固相，然后同時加入待測樣本和酶標記的小分子 ，兩種小分子競爭與固相上的抗小分子的特異性抗體結(jié)合，溫育一定時間后洗滌，加入酶底物顯色。