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轉(zhuǎn)氫酶1(比色法)測(cè)試盒TH-1活性計(jì)算
點(diǎn)擊次數(shù):225 更新時(shí)間:2024-03-18

一、TH-1活性計(jì)算

1、用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下:

(1) 按樣本蛋白濃度計(jì)算

單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘產(chǎn)生1 nmol APADPH定義為一個(gè)酶活性單位。

 TH-1活性(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr)÷T=149×ΔA÷Cpr

(2) 按樣本鮮重計(jì)算

單位的定義:每g組織每分鐘產(chǎn)生1 nmol APADPH定義為一個(gè)酶活性單位。

TH-1活性(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=74.5×ΔA÷W

(3) 按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算

單位的定義:每1萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘產(chǎn)生1 nmol APADPH定義為一個(gè)酶活性單位。

TH-1活性(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(500×V樣÷V樣總) ÷T=0.149×ΔA

V反總:反應(yīng)體系總體積,2×10-4 L;ε:APADPH摩爾消光系數(shù),6.7×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.02 mL;V樣總:加入提取液體積,0.5mL;T:反應(yīng)時(shí)間,10 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;500:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),500萬(wàn)。

2、用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下:

(1) 按樣本蛋白濃度計(jì)算

單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘產(chǎn)生1 nmol APADPH定義為一個(gè)酶活性單位。

 TH-1活性(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr)÷T=298×ΔA÷Cpr

(2) 按樣本鮮重計(jì)算

單位的定義:每g組織每分鐘產(chǎn)生1 nmol APADPH定義為一個(gè)酶活性單位。

TH-1活性(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=149×ΔA÷W

(3) 按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算

單位的定義:每1萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘產(chǎn)生1 nmol APADPH定義為一個(gè)酶活性單位。

TH-1活性(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(500×V樣÷V樣總) ÷T=0.298×ΔA

V反總:反應(yīng)體系總體積,2×10-4 L;ε:APADPH摩爾消光系數(shù),6.7×103 L / mol /cm;d:96孔板光徑,0.5cm;V樣:加入樣本體積,0.02 mL;V樣總:加入提取液體積,0.5mL;T:反應(yīng)時(shí)間,10 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;500:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),500萬(wàn)。


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