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產(chǎn)品展示
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鮑皰疹樣病毒染料法熒光定量PCR試劑盒
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產(chǎn)品型號:
50T
產(chǎn)品報價:
產(chǎn)品特點:
鮑皰疹樣病毒染料法熒光定量PCR試劑盒調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
  50T鮑皰疹樣病毒染料法熒光定量PCR試劑盒的詳細資料:

特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
儲存條件:-20℃以下,有效期12個月。

產(chǎn)品名稱鮑皰疹樣病毒染料法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱Abalone Herpes-like Virus(AbHV)
貨號BJ-R6321

使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

原理:
所謂實時熒光定量PCR技術(shù),是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。
檢測方法
1.SYBRGreenⅠ法:
在PCR反應(yīng)體系中,加入過量SYBR熒光染料,SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后,發(fā)射熒光信號,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號,從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步。
SYBR定量PCR擴增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法:
探針完整時,報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收;PCR擴增時,Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,即每擴增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步。

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磷酸化毛細血管擴張性共濟失調(diào)癥突變蛋白抗體 IHH ELISA Kit 印度刺猬因子(IHH)ELISA試劑盒
ATP5E蛋白抗體 NLRP3/C1orf7/CIAS1/NALP3/PYPAF1 ELISA Kit 隱熱蛋白(NLRP3/C1orf7/CIAS1/NALP3/PYPAF1)ELISA試劑盒
ATP5G2蛋白抗體 IDO ELISA Kit 吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO)ELISA試劑盒
ATP6V0D2蛋白抗體 Shh-N ELISA Kit 音猬因子N端(Shh-N)ELISA試劑盒
ATP6V1B2蛋白抗體 SHH ELISA Kit 音猬因子(SHH)ELISA試劑盒
ATPIF1蛋白抗體 Inhbb ELISA Kit 抑制素β-B(Inhbb)ELISA試劑盒
Attractin蛋白抗體 INHBA ELISA Kit 抑制素β-A(INHBA)ELISA試劑盒

ADK 腺苷酸激酶抗體
A2ML1 α2巨球蛋白樣蛋白1抗體 α2ML1
3-Apr 細胞凋亡相關(guān)蛋白3抗體
Actin 肌動蛋白α/α-SMA/α Actin抗體
ABCB7 ATP結(jié)合蛋白家族7抗體
ASCL2 ASCL2蛋白抗體
phospho-Ataxin 1(Ser775) 磷酸化脊髓小腦失調(diào)癥蛋白1抗體
phospho-ATF1 (Ser63) 磷酸化活化轉(zhuǎn)錄因子1抗體
phospho-ATF2 (Ser480) 磷酸化活化復(fù)制因子2抗體
phospho-ATF2 (Thr51 + Thr53) 磷酸化活化復(fù)制因子2抗體
phospho-ATF2 (Thr69 + Thr51) 磷酸化活化復(fù)制因子2抗體
phospho-ATF2 (Thr73 + Thr55) 磷酸化活化復(fù)制因子2抗體
phospho-ATF2 (Thr71 + Thr53) 磷酸化活化復(fù)制因子2抗體
phospho-ATF2(Thr71) 磷酸化活化復(fù)制因子2抗體
ATF5 活化轉(zhuǎn)錄因子5抗體
ATF6 beta 活化轉(zhuǎn)錄因子6β抗體
ATIC AICAR甲?;D(zhuǎn)移酶抗體
phospho-ATM (Ser794) 磷酸化毛細血管擴張性共濟失調(diào)癥突變蛋白抗體
ATP5E ATP5E蛋白抗體
ATP5G2 ATP5G2蛋白抗體
ATP6V0D2 ATP6V0D2蛋白抗體
鮑皰疹樣病毒染料法熒光定量PCR試劑盒ATP6V1B2 ATP6V1B2蛋白抗體
ATPIF1 ATPIF1蛋白抗體
Attractin Attractin蛋白抗體
Phospho-Aurora B(Tyr12) 磷酸化有絲分裂激酶B抗體
實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。設(shè)立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 鮑皰疹樣病毒 染料法 熒光定量PCR試劑盒
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