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產(chǎn)品展示
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化膿性鏈球菌探針法熒光定量PCR試劑盒
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產(chǎn)品型號:
50T
產(chǎn)品報(bào)價(jià):
產(chǎn)品特點(diǎn):
化膿性鏈球菌探針法熒光定量PCR試劑盒全新的熱啟動(dòng)DNA聚合酶-Hot Start Taq DNA聚合酶,可在PCR反應(yīng)的過程中抑制非特異擴(kuò)增,從而大限度地減少非特異性擴(kuò)增產(chǎn)物的產(chǎn)生,提高熒光定量PCR反應(yīng)的特異性。
  50T化膿性鏈球菌探針法熒光定量PCR試劑盒的詳細(xì)資料:

儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

產(chǎn)品名稱

化膿性鏈球菌探針法熒光定量PCR試劑盒

英文名稱

Streptococcus pyogenes

貨號

BJ-R7231

產(chǎn)品特點(diǎn):
1. 化膿性鏈球菌探針法熒光定量PCR試劑盒使用化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)聚合酶,反應(yīng)特異性高,*程度地避免了非特異擴(kuò)增;
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化,反應(yīng)靈敏快速,40個(gè)循環(huán)只需20多分鐘;
3. 抗干擾能力強(qiáng),反應(yīng)重復(fù)性高,適合對土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,zui后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
 特異性熒光標(biāo)記:
 TaqMan法
 TaqMan探針的特性:
(1)5′端標(biāo)記有報(bào)告基團(tuán)(Reporter, R),如FAM、VIC等
(2)3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) (Quencher, Q)
(3)探針完整,R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ,無熒光, R與Q分開,發(fā)熒光
(4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探針
相對定量通過內(nèi)標(biāo)定量:
內(nèi)標(biāo)(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中定,受環(huán)境因素影響小,內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。
檢測步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個(gè)測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR實(shí)驗(yàn)步驟
典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán),通過多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其主要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

芐橙英文名稱:Benzyl orange分子式:801.78分子量: C35H25N5Na2O9S3:2429-80-3

4,4'-二溴-2,2-二吡分子式:英文名稱:4,4'- -2,2- two pyridine bromide:44415分子量:

1-乙-4-[(4-甲氧)乙炔]分子式:236.31英文名稱:1- ethyl -4-[(4-) - based acetylene group:63221-88-5分子量: C17H16O

1-(4-)吡唑分子式:159.19英文名稱:1- (4-):17635-45-9分子量: C9H9N3

檸檬酸鉍鉀分子式:495.98英文名稱:Bismuth citrate:分子量: BiK2C6H7O7·H2O

3-羥-1-甲-5-三氟甲-1H-吡唑分子式:166.1英文名稱:3- hydroxy -1- methyl -5- three -1H-:119022-51-4分子量: C5H5F3N2O

2-氟-3-分子式:125.14英文名稱:2- -3- methyl aniline:1978-33-2分子量: C7H8FN

1,4-雙(α-羥六氟異丙)分子式:410.16英文名稱:1,4- bis (alpha hydroxy six f Yi Bingji) benzene:1992-15-0分子量: C12H6F12O2·xH2O

對叔丁氯分子式:168.66英文名稱:Para tert butyl chloride:3972-56-3分子量: C10H13CL

乙黃原酸鉀分子式:160.3英文名稱:Potassium ethyl potassium:140-89-6分子量: C3H5KOS2

丙正丁酯英文名稱:Butyl propionate分子式:130.18分子量: C7H14O2:590-01-2

化膿性鏈球菌探針法熒光定量PCR試劑盒MX-1(人腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion

麥芽浸膏湯 規(guī)格: 250g 用途: 用于酵母和霉菌的培養(yǎng),還用于酸性罐食品商業(yè)無菌檢驗(yàn)(GB/T4789.26-2003)。

Thormley氏氨酸雙水解酶培養(yǎng)基/氨酸雙水解酶試驗(yàn)用培養(yǎng)基/AD細(xì)菌氨酸水解試驗(yàn),用于假單胞菌屬鑒別;弧菌的氨酸試驗(yàn)5克國產(chǎn)/進(jìn)口

小鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞英文名稱:MouseS

玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基/虎紅鈉瓊脂培養(yǎng)基/Rose Bengal Agar藥品生物制品真菌、酵母菌計(jì)數(shù)250克國產(chǎn)/進(jìn)口

人絨毛膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞水球菌 Salinococcus sp.

人腺高轉(zhuǎn)移細(xì)胞英文名稱:MDA-MB-435

雜交瘤細(xì)胞抗 AChE苜蓿中華瘤菌 Sinorhizobium meliloti

沙保弱氏瓊脂平板10塊國產(chǎn)/進(jìn)口

無翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員4(WNT4)重組蛋白英文名稱:Recombinant Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 4 (WNT4)

松弛肽(RLN)重組蛋白英文名稱:Recombinant Relaxin (RLN)

 

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 化膿性鏈球菌 探針法 熒光定量PCR試劑盒
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