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公司公告

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產(chǎn)品展示
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比氏腸微孢蟲(chóng)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
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產(chǎn)品型號(hào):
50T
產(chǎn)品報(bào)價(jià):
產(chǎn)品特點(diǎn):
比氏腸微孢蟲(chóng)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒全新的熱啟動(dòng)DNA聚合酶-Hot Start Taq DNA聚合酶,可在PCR反應(yīng)的過(guò)程中抑制非特異擴(kuò)增,從而大限度地減少非特異性擴(kuò)增產(chǎn)物的產(chǎn)生,提高熒光定量PCR反應(yīng)的特異性。
  50T比氏腸微孢蟲(chóng)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒的詳細(xì)資料:

實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR實(shí)驗(yàn)步驟
典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán),通過(guò)多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其主要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長(zhǎng)短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開(kāi)始摻入,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。

儲(chǔ)存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

產(chǎn)品名稱

比氏腸微孢蟲(chóng)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒

英文名稱

Enterocytozoon bieneusi ?

貨號(hào)

BJ-R6665

產(chǎn)品特點(diǎn):
1. 比氏腸微孢蟲(chóng)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒使用化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)聚合酶,反應(yīng)特異性高,*程度地避免了非特異擴(kuò)增;
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化,反應(yīng)靈敏快速,40個(gè)循環(huán)只需20多分鐘;
3. 抗干擾能力強(qiáng),反應(yīng)重復(fù)性高,適合對(duì)土壤、糞便、腫瘤和血液來(lái)源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測(cè)分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,zui后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
 特異性熒光標(biāo)記:
 TaqMan法
 TaqMan探針的特性:
(1)5′端標(biāo)記有報(bào)告基團(tuán)(Reporter, R),如FAM、VIC等
(2)3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) (Quencher, Q)
(3)探針完整,R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ,無(wú)熒光, R與Q分開(kāi),發(fā)熒光
(4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探針
相對(duì)定量通過(guò)內(nèi)標(biāo)定量:
內(nèi)標(biāo)(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中定,受環(huán)境因素影響小,內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。
檢測(cè)步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽(yáng)性對(duì)照),每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽(yáng)性對(duì)照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。

以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

組織中鏈酮脂酰輔酶A硫解酶(KETOACYL COA THIOLASE)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次

高質(zhì)型ECL免疫印跡化學(xué)發(fā)光溶 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:A:100毫升B:500微升1000cm2

小量腺病毒樹(shù)脂法初級(jí)純化試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:10次

細(xì)胞PCTA1RE1激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次

超氧化物歧化酶(SOD)細(xì)菌裂解樣品制備試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格: 50次

石蠟切片免疫組織化學(xué)AP酶聯(lián)NBT/BCIP*間接檢測(cè)試劑盒(含一抗和AP二抗) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:10次

體α-L-巖藻糖苷酶(AFU)比色法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次

體單胺氧化酶A型(MAO-A)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次

DEAE噬菌體DNA純化樹(shù)脂制備試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:1次

體黃氧化酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次

植物組織DNA損傷彗星熒光檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次

氣生蘭(epiphytic)克隆增殖培養(yǎng)基 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:500毫升溶/片劑

比氏腸微孢蟲(chóng)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒緩沖蛋白胨水(緩沖胨水增菌) (BPW) 規(guī)格: 250g 用途: 用于沙門(mén)氏菌前增菌培養(yǎng)。(美國(guó)FDA charpter 4)

A-375 [A375], 人惡性素瘤細(xì)胞株桿菌屬 Lactobacillus sp.

苜蓿中華瘤菌 Sinorhizobium meliloti棗椰球擬酵母 Torulopsis dattila

Beta-TC-6(小鼠胰島素瘤胰島β細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

NAMALWA(人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞)GES-1/胃上皮細(xì)胞

人肝動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

高氏合成一號(hào)瓊脂培養(yǎng)基/GAUZEˊs Medium 放線菌培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

毛柄金錢(qián)菌(金針菇) Flammulina velutipes大鼠腸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基

人色素瘤細(xì)胞白盤(pán)孢 Gloeosporium album

角蛋白4(KRT4)重組蛋白英文名稱:Recombinant Keratin 4 (KRT4)

HAVSMC, 人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 Human

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 比氏腸微孢蟲(chóng) 探針?lè)?/a> 熒光定量PCR試劑盒
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