服務流程: 接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數據分析——結果交付——售后服務。 產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 | 肉芽腫鞘桿菌LAMP試劑盒 | Sheath Bacillus granulomatosus lamp Kit | BJ-P987641 |
它具有下列特點: 1. 即開即用,用戶只需要提供 DNA 模板。 2. 引物經過精心優(yōu)化,專一性強,只擴增鮑皰疹樣病毒,與其他植物沒有交叉反應。 3. 提供陽性對照,便于區(qū)分假陰性樣品。 4. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次,但只能用于科研。 ? 使用及效果: PCR反應特點 (1) 特異性強 PCR反應的特異性決定因素為: ①引物與模板DNA特異正確的結合; ②堿基配對原則; ③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性; ④靶基因的特異性與保守性。 其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。 (2) 靈敏度高 PCR產物的生成量是以指數方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。 (3) 簡便、快速 PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。 (4) 對標本的純度要求低 不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術概論。 儲存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。 3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 PCR實驗方法步驟: 方法 1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5 μl dNTP mix (2mM) 4 μl 引物1(10pM) 2 μl 引物2(10pM) 2 μl Taq酶 (2U/μl) 1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。 3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 500g云芝栓孔菌 (變色栓菌)Human SFMBT1 (Scm-like with four MBT domains protein 1) ELISA KIT 25g假單胞菌Human RRNAD1 (Protein RRNAD1) ELISA KIT 5g羅伊氏乳桿菌Human SESTD1 (SEC14 domain and spectrin repeat-containing protein 1) ELISA KIT 5g大斑凸臍蠕孢Human SECISBP2L (Selenocysteine insertion sequence-binding protein 2-like) ELISA KIT 100g喜乳糖擬泡囊擔孢酵母Human RMI2 (RecQ-mediated genome instability protein 2) ELISA KIT 25g谷氨酸棒桿菌Ⅲ型Human S100PBP (S100P-binding protein) ELISA KIT 5g大腸埃希菌Human MSRB1 (Methionine-R-sulfoxide reductase B1) ELISA KIT 100g黑附球菌Human SAC3D1 (SAC3 domain-containing protein 1) ELISA KIT 25g無花果曲霉Human RTBDN (Retbindin) ELISA KIT 500g銹赤蠟黃鏈霉菌Human RHEBL1 (GTPase RhebL1) ELISA KIT 25g膜醭假絲酵母Human RHOT1 (Mitochondrial Rho GTPase 1) ELISA KIT 5g堿線菌屬Human AHR(Aryl hydrocarbon receptor) ELISA Kit 100gRhizobium multihospitium Human RD3 (Protein RD3) ELISA KIT 25g甘蔗生節(jié)棱孢Human RASAL1 (RasGAP-activating-like protein 1) ELISA KIT 5g根瘤菌Human RRAD (GTP-binding protein RAD) ELISA KIT 25g釀酒酵母Human AHR(Aryl hydrocarbon receptor) ELISA Kit 5g異常漢遜酵母Human RHOT1 (Mitochondrial Rho GTPase 1) ELISA KIT 肉芽腫鞘桿菌LAMP試劑盒Phospho-Cytokeratin 17 (Ser44) 磷酸化細胞角蛋白17抗體氟伐他汀鈉Tris(6,6,7,7,8,8,8-heptafluoro-2,2-dimethyl-3,5-octanedionate)europium(III) hydrate,Eu(FOD)3Human IGF2BP3 (Insulin Like Growth Factor 2 mRNA Binding Protein 3) ELISA Kit CK19 細胞角蛋白19抗體對氨基酚3-巰基-1-烷磺酸Human TTN (Titin) ELISA Kit CK19 細胞角蛋白19抗體鹽酸賽利洛爾3-巰基-1-烷磺酸Human IGF2R (Insulin Like Growth Factor 2 Receptor) ELISA Kit CK20 細胞角蛋白20抗體阿卡波糖2-(N-Fmoc)-氨基-1,3-丁二Human IGFALS (Insulin Like Growth Factor Binding Protein, Acid Labile Subunit) ELISA Kit CK1/8/19 細胞角蛋白1/8/19抗體鹽酸米安色林1,4-氘代二氧六環(huán)Human IGFBP-1 (Insulin Like Growth Factor Binding Protein 1) ELISA Kit CK2 細胞角蛋白2抗體維庫溴銨1,4-氘代二氧六環(huán)Human IGFBP-5 (Insulin Like Growth Factor Binding Protein 5) ELISA Kit CK3 細胞角蛋白3抗體富馬酸喹硫平2,3,4,5,6-五氟溴芐Human IGFBP-4 (Insulin Like Growth Factor Binding Protein 4) ELISA Kit CK4 細胞角蛋白4抗體氮磷汀2,3,4,5,6-五氟溴芐Human Anti-CIIAb (Anti-Type II Collagen Antibody) ELISA Kit 操作步驟: 1:樣品準備:取1毫升細胞培養(yǎng)上清(貼壁和懸浮細胞都可以 已培養(yǎng)48小時以上),在16000g離心5分鐘,小心棄去上清,避免丟失沉淀(沉淀量有可能很少,目視看不到)。將沉淀用無菌PBS重懸,在16000g離心5分鐘,同樣小心棄去上清,如此反復用無菌PBS洗三次 將獲得的沉淀用100微升超純水重懸,置于100℃水浴中孵育5分鐘。如此制備好的樣品可在4℃保存1到2個月。 2:PCR反應的準備: 待各組份融化后先瞬時離心,然后輕彈混勻。按下表在已滅菌的PCR管中配制反應體系,每次實驗需加一個陰性和一個陽性對照,測試反應管可以有多個。配制過程中應注意無菌,并注意避免操作產生的氣溶膠造成樣品間的交叉污染,推薦在有風壓的設備如超凈臺或生物安全柜中進行操作。建議配制完畢后瞬時離心以使液體沉至管底。 |