PCR反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 
引物： 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。
設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3’端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3’端的堿基，特別是zui末及倒數(shù)*個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。 
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點，被擴增的靶序列zui有適宜的酶切位點，這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：禽腦脊髓炎病毒RT-LAMP試劑盒價格
英文名稱：RT-LAMP kit for avian encephalomyelitis virus
貨號：BJ-P987485
產(chǎn)品規(guī)格：50T
分類：熒光定量PCR試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。
產(chǎn)品特點：
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。?

產(chǎn)品特點：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達10~100拷貝；

◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進行多個檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
樣品要求及注意事項：
1、 如果提供實驗材料，實驗材料必須保證新鮮，請您采樣后立刻放入液氮中速凍或加入樣穩(wěn)定劑，并用干冰運輸。
2、 如果樣品可以用Trigol法提總RNA ，也可以將樣品研磨后放在 Trigol中，動植物組織 ： 50～100mg/mlTrigol，貼壁細(xì)胞：10cm2/mlTrigol，懸浮細(xì)胞：5×106動植物，酵母細(xì)胞或細(xì)菌細(xì)胞10×107/mlTrigol。
3、 如果提供RNA或cDNA我們要對您提供的材料進行評估。
4、 實時熒光定量PCR服務(wù)您一定要提供樣品及要擴增基因的詳細(xì)信息。
儲存條件：
14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
使用方法:
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。
1. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液，*用帶芯槍頭，下同）。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL，試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個樣品，則需要進行 N+2 個樣品提取，多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)（20μL 體系，在樣品制備室進行）
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+9 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），6 個用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析，并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+4 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），1 個用于PCR 陽性對照。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
25g擬莖點霉Human GABARAPL1 ELISA Kit

250mg長鹽土生古菌Human GABPB2 ELISA Kit

1g大腸埃希氏菌Human FXYD6 ELISA Kit

25g蘇云金芽孢桿菌庫爾斯塔克亞種Human GABARAPL2 ELISA Kit

5g蟹枝毛殼Human FXYD4 ELISA Kit

25g矮小傘枝霉Human FXYD3 ELISA Kit

5g蘇云金芽胞桿菌多窩亞種Human FXYD7 ELISA Kit

250mg陰溝腸桿菌Human FYTTD1 ELISA Kit

1g埋藏曲霉Human FXYD4 ELISA Kit

5g異常漢遜酵母Human FXYD6 ELISA Kit

10MG泛酸枝芽孢桿菌Human FXYD7 ELISA Kit

1g 野蘑菇Human FUT10 ELISA Kit

25g多根硬皮馬勃Human FYTTD1 ELISA Kit

5g相思根瘤菌Human FUT4 ELISA Kit

25g乳桿菌屬Human FUT7 ELISA Kit

5g枯草芽胞桿菌Human FUT11 ELISA Kit

1g豬輪狀病毒Human FUT8 ELISA Kit

禽腦脊髓炎病毒RT-LAMP試劑盒價格OGYE Agar Oxytetracycline-Glucose-Yeast Ectract Agar Base人骨骼肌細(xì)胞cDNA5-溴-2-氯苯甲CK5(Cytokeratin 5)  細(xì)胞角蛋白5抗原

OGYE瓊脂/土霉素葡萄糖酵母瓊脂人骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞cDNA氯化銥(III) 水合物CK7(Cytokeratin 7)human  細(xì)胞角蛋白7抗原

OGYE 選擇添加劑人骨骼肌成肌細(xì)胞cDNA4-氨基-7H-吡咯[2,3-d]嘧啶CK8(Cytokeratin 8)  細(xì)胞角蛋白8（多肽）

Orange serum agar橙血清瓊脂人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞cDNA4-氨基-7H-吡咯[2,3-d]嘧啶CKIP-1(casein kinase 2 interaction protein 1)  酪蛋白激酶2相互作用蛋白1抗原

Oxford Listeria selective agar( base) 牛津李斯特氏菌選擇瓊脂（基礎(chǔ)）人腎近曲小管上皮細(xì)胞cDNA4-（氯甲酰）丁酸甲酯CLCA4(Calcium-activated chloride channel 4)  鈣激活氯離子通道4抗原

Oxford Listeria selective supplement 牛津李斯特氏菌選擇添加劑人腎皮質(zhì)上皮細(xì)胞cDNA4-（氯甲酰）丁酸甲酯C-Mer/MERTK (proto-oncogene tyrosine kinase)  c-mer原癌基因酪氨酸激酶抗原

PALCAM Listeria selective agar( base) acc.to van Netten et al.PALCAM人腎上皮細(xì)胞cDNA戊二酸單甲酯c-Myc tag   c-Myc tag標(biāo)簽多肽

李斯特氏菌瓊脂（基礎(chǔ)）人腎系膜細(xì)胞cDNA戊二酸單甲酯AU5 tag  AU5 tag標(biāo)簽抗原

注意事項:
1. 建議使用新鮮采取的動物組織，若為長期冷凍組織，應(yīng)盡量避免反復(fù)凍融，否則會導(dǎo)致模板的降解，影響PCR效率。
2. 試劑Buffer AL若低溫保存，易產(chǎn)生沉淀。在使用前務(wù)必將其在室溫中放置一段時間，也可在37℃水浴中預(yù)熱10 min，以溶解沉淀，混勻后再使用。
3. 電泳檢測時，切勿使用含有SDS的Loading Buffer。否則，電泳時會在泳道中出現(xiàn)一大團拖尾亮帶，影響實驗結(jié)果。
4. 建議擴增片段長度1 kb以內(nèi)，以便擴增效率佳。
5. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。