服務(wù)流程: 接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。 產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) | 漏斗狀帶絳蟲LAMP試劑盒價(jià)格 | Lamp kit for Taenia excavatum | BJ-P987700 |
它具有下列特點(diǎn): 1. 即開即用,用戶只需要提供 DNA 模板。 2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化,專一性強(qiáng),只擴(kuò)增鮑皰疹樣病毒,與其他植物沒有交叉反應(yīng)。 3. 提供陽性對(duì)照,便于區(qū)分假陰性樣品。 4. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次,但只能用于科研。 ? 使用及效果: PCR反應(yīng)特點(diǎn) (1) 特異性強(qiáng) PCR反應(yīng)的特異性決定因素為: ①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合; ②堿基配對(duì)原則; ③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性; ④靶基因的特異性與保守性。 其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。 (2) 靈敏度高 PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。 (3) 簡便、快速 PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。 (4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低 不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。 儲(chǔ)存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。 3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟: 方法 1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5 μl dNTP mix (2mM) 4 μl 引物1(10pM) 2 μl 引物2(10pM) 2 μl Taq酶 (2U/μl) 1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。 3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。 4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。 1g多根硬皮馬勃Human ZNF48 ELISA Kit 5g炭疽芽胞桿菌Human ZNF486 ELISA Kit 1g谷氨酸棒桿菌Ⅲ型Human ZNF483 ELISA Kit 5g果生鏈核盤菌Human ZNF488 ELISA Kit 250mg玉蜀黍平臍蠕孢*Human ZNF394 ELISA Kit 1g缺陷短波單胞菌Human ZNF395 ELISA Kit 5g微黃色芽孢桿菌Human ZNF311 ELISA Kit 1g尖孢鐮孢Human RBL1(Retinoblastoma-like protein 1) ELISA Kit 250mg雞傷寒沙門氏菌Human ZNF410 ELISA Kit 1g腐皮鐮刀菌(都只確定鐮刀屬)Human ZNF397 ELISA Kit 1g葉居菌Human ZNF320 ELISA Kit 250mg釀酒酵母Human RBP1(Retinol-binding protein 1) ELISA Kit 5g釀酒酵母Human ZNF326 ELISA Kit 100g冷纖維單胞菌Human ZNF323 ELISA Kit 25g根瘤菌Human ZNF320 ELISA Kit 5g盤長孢狀刺盤孢Human ZNF323 ELISA Kit 100g三葉草根瘤菌Human ZNF326 ELISA Kit 漏斗狀帶絳蟲LAMP試劑盒價(jià)格phospho-FOXO4 (Ser197) 磷酸化叉頭蛋白4抗體乳香特戊酸氯甲酯Human α-La (Alpha-Lactalbumin) ELISA Kit phospho-FOXO4 (Ser262) 磷酸化叉頭蛋白4抗體南板藍(lán)根特戊酸氯甲酯Human SNCα (Synuclein Alpha) ELISA Kit FPRL1 脂氧素受體1抗體浙貝母特戊酸氯甲酯Human PDGFRβ (Platelet Derived Growth Factor Receptor Beta) ELISA Kit Measles virus fusion protein 麻疹病毒融合蛋白抗體黃芪(蒙古黃芪)吲哚-2-甲Human β2-GP1 Ab IgA (β2-Glycoprotein 1 antibody IgA) ELISA Kit TBX2/T-box2 血栓素B2抗體(一種新發(fā)現(xiàn)的抑癌基因)黑豆吲哚-2-甲Human PIICP (Procollagen II C-Terminal ProPeptide) ELISA Kit FSH receptor 促卵泡刺激素受體抗體山豆根1-甲基吲哚-3-甲Human β2-GP1 Ab IgG (β2-Glycoprotein 1 Antibody IgG) ELISA Kit Follistatin 卵泡抑素抗體北豆根2,5-二磺酰氯Human β2-GP1 Ab IgM (β2-Glycoprotein 1 Antibody IgM) ELISA Kit FSP/Spastin 纖維母細(xì)胞表面蛋白抗體白鮮皮2,5-二磺酰氯Human PCDHγA2 (Protocadherin Gamma A2) ELISA Kit 操作步驟: 1:樣品準(zhǔn)備:取1毫升細(xì)胞培養(yǎng)上清(貼壁和懸浮細(xì)胞都可以 已培養(yǎng)48小時(shí)以上),在16000g離心5分鐘,小心棄去上清,避免丟失沉淀(沉淀量有可能很少,目視看不到)。將沉淀用無菌PBS重懸,在16000g離心5分鐘,同樣小心棄去上清,如此反復(fù)用無菌PBS洗三次 將獲得的沉淀用100微升超純水重懸,置于100℃水浴中孵育5分鐘。如此制備好的樣品可在4℃保存1到2個(gè)月。 2:PCR反應(yīng)的準(zhǔn)備: 待各組份融化后先瞬時(shí)離心,然后輕彈混勻。按下表在已滅菌的PCR管中配制反應(yīng)體系,每次實(shí)驗(yàn)需加一個(gè)陰性和一個(gè)陽性對(duì)照,測(cè)試反應(yīng)管可以有多個(gè)。配制過程中應(yīng)注意無菌,并注意避免操作產(chǎn)生的氣溶膠造成樣品間的交叉污染,推薦在有風(fēng)壓的設(shè)備如超凈臺(tái)或生物安全柜中進(jìn)行操作。建議配制完畢后瞬時(shí)離心以使液體沉至管底。 |